Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維介紹

更新時(shí)間：2024-03-19 點(diǎn)擊次數(shù)：630次

Tau 和 Alpha突觸核蛋白共聚集體原纖維

SPR-494，重組人Tau-352 (胚

胎 0N3R) 和 Alpha 突觸核蛋白

共聚集體原纖維

• StressMarq的共聚集體原纖維

是用兩種蛋白的單體共同孵育

形成的原纖維

• Tau 和 Asyn蛋白存在于同一條

纖維上

Tau-352 (胚胎 0N3R) 和

Alpha 突觸核蛋白共聚集體

原纖維（SPR-494）既可以

聚集Asyn單體也可以聚集

Asyn和Tau 蛋白單體的混合

物

• Tau蛋白單體也可以被聚集，

但是ThT信號(hào)不明顯

SPR-495，重組人Tau-441

(2N4R) 和 Alpha 突觸核蛋白共

聚集體原纖維

• StressMarq的共聚集體原纖維

是用兩種蛋白的單體共同孵育

形成的原纖維

• Tau 和 Asyn蛋白存在于同一條

纖維上

Tau-441 (2N4R) 和 Alpha 突

觸核蛋白共聚集體原纖維

（SPR-495）既可以聚集

Asyn單體也可以聚集Asyn和

Tau 蛋白單體的混合物

• Tau蛋白單體也可以被聚集，

但是ThT信號(hào)不明顯

Tau & Alpha 突觸核蛋白共聚集體原纖維

的免疫電鏡圖。6nm 膠體金信號(hào)來自α突

觸核蛋白，12nm 膠體金信號(hào)來自tau蛋

白。可看到兩種信號(hào)同時(shí)出現(xiàn)在SPR-494

和SPR-495的單條纖維上。而對(duì)照組不會(huì)

同時(shí)出現(xiàn)兩種信號(hào)。

實(shí)驗(yàn)方法：原纖維被吸附到碳涂層銅網(wǎng)格上。網(wǎng)格用含1% BSA 和 0.1% Tween-20 的PBS 封閉，洗滌，然后依次在封閉緩沖液中用 20 µg/mL 的一抗孵育，洗滌，再在封閉緩沖液中用 20 µg/mL 的二抗孵育，洗滌并用2% 乙酸雙氧鈾作為負(fù)染色。 6nm（asyn）和 12nm（tau）信號(hào)同時(shí)出現(xiàn)在共聚集體原纖維樣品的同一原纖維鏈中，并且在對(duì)照 α- 突觸核蛋白或 tau 原纖維中未觀察到抗體交叉反應(yīng)。一抗：小鼠抗人asyn單克隆抗體（StressMarq SMC-532）和兔抗人tau多克隆抗體（StressMarq SPC-802）；二抗：6nm 膠體金標(biāo)記的山羊抗小鼠抗體 (Jackson ImmunoResearch 115-195-146) 和 12nm膠體金標(biāo)記的山羊抗兔抗體 (Jackson ImmunoResearch 115-195-146)。

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